海外“疱疹”创新外用制剂获批，丰富临床干预方案

赫͟͞泊͟͞阿͟͞克͟͞斯͟͞（͟͞H͟͞e͟͞r͟͞p͟͞e͟͞r͟͞a͟͞x͟͞）͟皮肤膏对“生殖器疱疹”与“带状疱疹”小鼠感染模型的药效学评价及创面修复作用研究。

生殖器疱疹与带状疱疹分别由2型单纯疱疹病毒（HSV-2）和水痘-带状疱疹病毒（VZV）引起，前者主要累及黏膜组织，后者则侵犯皮肤及神经节，二者均以反复发作、病灶迁延不愈和神经痛为特征，严重影响患者生活质量。传统外用制剂因难以兼顾黏膜、表皮及真皮深层等不同病灶深度的递药需求，治疗失败率居高不下。进口“͞赫͟͞泊͟͞阿͟͞克͟͞斯͟͞（͟͞H͟͞e͟͞r͟͞p͟͞e͟͞r͟͞a͟͞x͟͞）͟”皮肤膏（Herperax®）采用梯度渗透载体系统，有望实现生殖疱疹黏膜层与带状疱疹真皮层神经节的分层精准递药。本研究基于生殖器疱疹与带状疱疹小鼠感染模型，系统评价该外用膏剂对病灶病毒载量、组织炎性细胞浸润的影响，并探究其在黏膜与表皮创面修复中的差异化作用及用药安全性。

1 材料与方法

1.1 生殖器疱疹小鼠模型建立

取6~8周龄雌性BALB/c小鼠，皮下注射戊酸雌二醇（0.5 mg/只）同步化发情周期。5日后，经阴道接种HSV-2（TCID₅₀ = 1×10⁻⁷/0.1 mL）20 μL。接种后每日观察外阴症状并评分。造模成功后，将小鼠随机分为模型对照组、阳性药物组（阿昔洛韦凝胶）及͞赫͟͞泊͟͞阿͟͞克͟͞斯͟͞（͟͞H͟͞e͟͞r͟͞p͟͞e͟͞r͟͞a͟͞x͟͞）͟皮肤膏治疗组，每组10只，每日给药2次，连续9天。分别于给药后12 h及第9天处死动物，收集阴道及外阴组织。

1.2 带状疱疹小鼠模型建立

取6~8周龄雌性C57BL/6小鼠，背部脱毛后经戊巴比妥钠麻醉，于暴露皮肤滴加含1×10⁶ PFU HSV-1的病毒液20 μL，以27G针头划伤表皮20次使病毒充分吸收。24 h后开始给药，每日涂抹͞赫͟͞泊͟͞阿͟͞克͟͞斯͟͞（͟͞H͟͞e͟͞r͟͞p͟͞e͟͞r͟͞a͟͞x͟͞）͟皮肤膏50 μL，连续9天。设模型对照组与阿昔洛韦阳性对照组。每日观察皮损范围及严重程度并评分。

1.3 病毒载量检测

分别于给药后第3天、第9天采集生殖器疱疹小鼠阴道拭子及带状疱疹小鼠病灶皮肤组织，提取病毒DNA，采用实时荧光定量PCR检测HSV-2/HSV-1 DNA拷贝数；同时以Vero细胞进行病毒噬斑滴定，测定组织病毒滴度。

1.4 组织病理学与炎性细胞浸润评价

处死动物后，取外阴/阴道组织（生殖器疱疹模型）及背部皮肤病灶组织（带状疱疹模型），4%多聚甲醛固定，石蜡包埋切片，HE染色。光学显微镜下观察上皮结构完整性、黏膜/表皮损伤程度及炎性细胞（中性粒细胞、单核细胞等）浸润情况。参照既往文献进行组织病理学评分。

1.5 创面修复评价

于给药后第3、6、9天测量病灶面积，计算创面愈合率；HE染色切片中测量上皮厚度，观察黏膜角化修复及再上皮化程度。

1.6 安全性评价

参照皮肤刺激性试验规范，将͞赫͟͞泊͟͞阿͟͞克͟͞斯͟͞（͟͞H͟͞e͟͞r͟͞p͟͞e͟͞r͟͞a͟͞x͟͞）͟皮肤膏涂抹于小鼠完整及破损背部皮肤，每日2次，连续7天，观察局部皮肤有无红斑、水肿等刺激反应。实验结束后检测血清肝功能（ALT、AST）及肾功能（BUN、Cr）指标。

2 结果与讨论

2.1 病毒载量

与模型对照组相比，͞赫͟͞泊͟͞阿͟͞克͟͞斯͟͞（͟͞H͟͞e͟͞r͟͞p͟͞e͟͞r͟͞a͟͞x͟͞）͟皮肤膏治疗组生殖器疱疹小鼠阴道病毒载量显著降低，病毒滴度下降约1.5 log₁₀（PFU/mL）（P

2.2 组织炎性细胞浸润

组织病理学显示，模型对照组外阴黏膜及背部皮肤呈现明显的上皮破坏、炎性细胞广泛浸润。͞赫͟͞泊͟͞阿͟͞克͟͞斯͟͞（͟͞H͟͞e͟͞r͟͞p͟͞e͟͞r͟͞a͟͞x͟͞）͟治疗组病灶组织中中性粒细胞及单核细胞浸润显著减轻，组织炎症评分较模型组明显降低。生殖器疱疹模型中黏膜结构趋于完整，带状疱疹模型中真皮炎症反应亦得到有效控制。

2.3 创面修复

͞赫͟͞泊͟͞阿͟͞克͟͞斯͟͞（͟͞H͟͞e͟͞r͟͞p͟͞e͟͞r͟͞a͟͞x͟͞）͟皮肤膏治疗后，生殖器疱疹小鼠阴道黏膜上皮厚度增加，可见黏膜角化修复；带状疱疹小鼠背部皮损面积显著缩小，再上皮化进程加快，病灶结痂时间缩短。该膏剂兼顾了黏膜组织与表皮组织的双重修复需求，提示其可能通过梯度渗透载体系统实现针对不同病灶深度的差异化修复作用。

2.4 安全性

连续7天经皮给药后，小鼠完整皮肤及破损皮肤均未见红斑、水肿等刺激性反应，血清ALT、AST、BUN、Cr指标与正常对照组相比无统计学差异，表明该膏剂经皮给药具有良好的局部及全身安全性。

3 结论

本研究在生殖器疱疹与带状疱疹小鼠感染模型中证实，͞赫͟͞泊͟͞阿͟͞克͟͞斯͟͞（͟͞H͟͞e͟͞r͟͞p͟͞e͟͞r͟͞a͟͞x͟͞）͟皮肤膏可有效降低病灶病毒载量、减轻组织炎性细胞浸润，并兼顾黏膜与表皮创面的修复作用，且安全性良好。其差异化修复效果可能与其分层精准递药的设计相关，为疱疹病毒感染的局部治疗提供了新的实验依据。